美国青蛙理想蛋白模式的探讨

 聂国兴 李学军 乔志刚 石灵(河南师范大学生命科学学院水产系，新乡453002)　　摘 要 通过分析美国青蛙体蛋白的必需氨基酸(EAA)组成，对美国有蛙的理想蛋白模式进行了初步探讨，为美国青蛙人工饲料配制奠定了理论基础。　　关键词 美国青蛙 理想蛋白　　理想蛋白(Ideal Protein,IP)的概念最早是由Howard于1958年提出来的，当时称为完全蛋白质(CompIete Protein)。随着动物营养学和饲料科学的发展，理想蛋白质的概念得到不断完善和充实。Fuller(1978)对IP的定义为“一种蛋白质，其营养价值不可能通过改变其氨基酸组合间的比例而得到提高”;Cole(1980)将IP定义为“各种必需氨基酸(EAA)以及供给合成非必需氨基酸(NEAA)的氮源之间具有最佳平衡的蛋白质”。二者虽措词不同，但含义是一致的。IP概念的建立，可以最大程度地提高氨基酸消化率、吸收率和利用率，使日粮蛋白质的转化效率达到最佳。同时，以IP为理论基础配制日粮，避免了日粮中的某些氨基酸因过剩带来的蛋白质浪费和环境污染。　　目前，猪和鸡的理想蛋白研究较多，已建立了一系列的畜禽理想蛋白模式。水产动物尚未见到相关报道。我们通过对美国青蛙体蛋白(腿肌蛋白)氨基酸组成进行分析，探讨了美国青蛙的理想蛋白模式。　　1 试验方法　　1．1 试验用蛙均由河南师范大学青蛙繁育基地提供，蛙体重150~200g。　　1．2 样品制备 随机捕取5只体格健壮的美国青蛙，编号(1~5)并记录体重，解剖后分别取其腿部新鲜肌肉10g，经丙酮多次脱脂后风干，将风干样品粉碎至80目(Φ0．18mm)。称取风干样品20mg，分别置入水解管中，向水解管加6mol／L的优级纯Hcl，然后将试管在距管口1cm处加热拉细至Φ2mm左右，再将水解管与真空泵相连，将管内真空抽至0．2mmHg柱之后，边抽真空边用酒精喷灯封闭管口，封口后将水解管置入烘箱，在110土1℃下水解24h。水解结束冷却后，将水解液倒入蒸发皿中，在80℃下水浴蒸干。蒸干物洗涤至100ml容量瓶中，用0．02mol／L的HCL定容后待测。　　1．3 样品测定 采用日立835—50型氨基酸分析仪测定美国青蛙蛋白中11种EAA含量。样品粗蛋白质含量测定采用GB／T6432—94所规定的方法。　　2 结果与讨论　　2．1 测定结果详见表1。氨基酸样品编号及测定结果(体重，g)X±S1(151)2(166)3(180)4(185)5(192)苏氨酸(Thr)1.41273.30853.20333.17143.06893.2330±0.1319甘氨酸(Gly)2.13092.12872.12902.12882.11472.1264±0.0066半胱氨酸(Cys)2.14672.05892.15662.14772.15002.1320±0.0410缬氨酸(Val)3.17823.12283.11293.08243.07143.1135±0.0419蛋氨酸(Met)2.69132.50542.61372.59612.48892.5791±0.0831异亮氨酸(Ile)3.36793.26892.80392.90012.80263.0287±0.2697亮氨酸(Leu)3.97574.02054.12073.92053.88783.9850±0.0913苯丙氨酸(Phe)1.59721.12641.08761.008721.07631.1949±0.2257组氨酸(His)2.16532.09001.99661.99541.98752.0470±0.0874精氨酸(Arg)3.78693.08673.10063.07043.07103.2231±0.3154赖氨酸(Lys)3.90833.88833.79843.66873.67533.7918±0.1085总和(Eaa)32.361130.605130.123329.788729.394430.4545±1.1548 　　由表1可见，美国青蛙体蛋白的EAA含量高而齐全。分析样品粗蛋白含量，测得数据为(45．34±1．46)％，EAA占粗蛋白的67％。EAA总和随着美国青蛙的个体发育而呈下降趋势，而EAA比例无显著变化，体现在日粮配制上，即为：日粮中粗蛋白的含量可随蛙的生长阶段不同而适当调整，但EAA比例相对衡定。　　2．2 Phillips和Brockway(1956)通过大量试验证实：与动物体蛋白的EAA组分相近似的饲料即为该动物的最佳饲料。我们的研究也表明：美国青蛙腿肌蛋白(或卵蛋白)的EAA组成模式和其EAA需要量模式具有一致性。以此为基础，设定lys值为100，我们确定的美国青蛙理想蛋白模式如下：Thr: G1y：Cys：Val：Met：Ile：Leu：Phe：His：Ary：Lys：＝85：56：56：82：68：80：105：32：54：85：100。　　2．3 以上理想蛋白模式的建立，基于以下两个假设：一是美国青蛙合成NEAA的氮源得到充分满足；二是EAA之间不存在颉抗或协同等互作关系。以此模式为基础配制的日粮，其应用价值有待于以美国青蛙日增重率，相对生长率等作为评判指标进一步深入研究。　　2．4 美国青蛙理想蛋白模式的建立，将使美国青蛙人工配合饲料配制的理论基础发生变化。即：由以粗蛋白含量为依据转变为以EAA含量及比例为依据。这种转变对于开发非常规饲料资源具有重要意义。非常规饲料资源存在着氨基酸含量不平衡，利用价值低的问题。但如果按理想蛋白质模式添加相应的氨基酸，使氨基酸平衡，就可提高其营养价值。　　2．5 美国青蛙理想蛋白模式是对美国青蛙体蛋白EAA组成和美国青蛙EAA需要量两方面研究进行综合分析得到的结果，它既可用于估测美国青蛙不同生长阶段对EAA的需要量，又可用于评定饲料蛋白质的营养价值。　　2．6 随着水产动物营养学和饲料学的发展，水产动物(如鱼、虾、蟹等)的理想蛋白模式将会更多更深入地被研究，建立。这也是饲料工业(开发非常规蛋白资源，节约常规蛋白资源)和环境保护(减少养殖动物氮、磷排放造成的水体富营养化)的需要。